4月13日，賽分科技聯(lián)合生物制品圈舉辦了主題為《抗體藥物純化工藝》的線上技術交流，其相關產(chǎn)品的優(yōu)異性能和豐富的應用案例吸引了千余位生物醫(yī)藥行業(yè)專業(yè)老師的熱情參與和踴躍互動。
本次直播中，賽分科技抗體項目技術總監(jiān)呂小林對抗體藥物的親和純化工藝、離子交換純化工藝進行了介紹，并與觀眾開展技術經(jīng)驗交流。賽分科技的MabPurix親和填料產(chǎn)品展現(xiàn)出與國際品牌相當?shù)男阅?，Monomix HC及Agarosix等系列離子交換填料產(chǎn)品在HCP去除、聚體去除、片段去除等方面也有優(yōu)異表現(xiàn)。
抗體純化工藝簡介
Protein A親和填料
1. 親和填料性能
表1. MabPurix 親和填料性能參數(shù)
駐留時間為5 min時，MabPurix P45 DBC為50 mg/mL，MabPurix A45 DBC為70 mg/mL，MabPurix A65 DBC為53 mg/mL，均具有較高載量，可高效捕獲抗體。
2. 親和填料壽命實驗
MabPurix P45在某單抗發(fā)酵液壽命實驗中，使用0.1 M NaOH和0.5 M NaOH交替CIP，使用160次后DBC依然保持在初始DBC的80%以上。
MabPurix A45在某單抗發(fā)酵液壽命實驗中，使用0.1 M NaOH和0.5 M NaOH交替CIP，使用140次后DBC依然保持在初始DBC的80%以上。
3. 親和填料泡堿實驗
實驗條件：
DBC樣品：某單抗發(fā)酵液
初始DBC完成后，靜置泡堿時間為24 h，后用平衡液沖洗層析柱，測試DBC；
后續(xù)DBC完成后，靜置泡堿時間為16-18 h
隨著泡堿時長增加，MabPurix A65和進口品牌A DBC下降趨勢接近，當泡堿時長達150 h時，兩者的載量均為初始值的80%。
4. 親和填料產(chǎn)品特性
--高載量
--良好耐堿性能
--較低反壓
--低Protein A脫落&低HCP殘留
--良好的親水性
--通過FDA DMF備案
--供應能力：500 L/批次
5. 親和填料臨床Ⅲ期應用案例
賽分科技MabPurix A65親和填料已成功應用于抗體藥物臨床Ⅲ期GMP生產(chǎn)，填裝內(nèi)徑800 mm的工業(yè)級層析柱，裝柱高度為18.5 cm，柱壓維持在1 bar以下。
陰離子交換填料
Agarosix-Q FF 陰離子交換填料基質(zhì)由球形、多分散、交聯(lián)度為 6%的瓊脂糖組成，具有高度的生物相容性和物理化學穩(wěn)定性。填料表面的高度親水性使得樣品與固定相間的非特異性吸附降至極低水平。離子交換官能團通過化學鍵連接在親水性瓊脂糖的表面, 可為生物分子提供出色的分離效果，并具有很高的效率和回收率。
1. 陰離子交換填料性能
表2. Agarosix-Q FF陰離子交換填料性能參數(shù)
2. 陰離子交換填料HCP去除效果
表3. Agarosix-Q FF陰離子交換填料純化結果
經(jīng)Agarosix-Q FF陰離子交換填料純化，樣品HCP殘留從21.70 ng/mL下降至1.64 ng/mL。
陽離子交換填料
Monomix HC 陽離子交換層析介質(zhì)以親水性聚甲基丙烯酸酯為基質(zhì)，粒徑為60 μm，孔徑1000 Å，具有良好的物理化學穩(wěn)定性。層析介質(zhì)表面經(jīng)賽分科技特殊處理，具有更好的親水性，最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附?？蓮V泛適用于抗體、疫苗、胰島素、蛋白、核酸、肝素等生物樣品的分離和純化。
1. 陽離子交換填料性能
表4. Monomix HC陽離子交換填料性能參數(shù)
2. 陽離子交換填料DBC測試
電導率為3，5.5，9 mS/cm時，分別采用某單抗和某雙抗樣品進行填料DBC測試。通常情況下，填料載量因電導率的升高呈現(xiàn)下降趨勢，但Monomix Mab60-SP對雙抗樣品的載量維持在較高水平，在該雙抗項目上表現(xiàn)出良好耐鹽性。
抗體純化工藝相關產(chǎn)品信息
訂購信息
包裝規(guī)格為5 L及以下, 10 L, 50 L，預裝柱規(guī)格為1, 4.2, 5 mL
精彩回答摘錄：
1．填料的Protein A配基脫落，用陰離子交換層析在什么條件下去除效果好？
賽分科技MabPurix親和填料的Protein A等電點為4.5-5.0，在陰離子交換層析步驟，調(diào)節(jié)pH7.0-7.5，抗體在中性條件下流穿，而Protein A配基與陰離子交換填料結合，實現(xiàn)對脫落配基去除。同時，MabPurix親和填料對Protein A配基脫落的控制表現(xiàn)優(yōu)異，因而減輕了陰離子交換層析步驟的除雜壓力。
2. 親和填料用20%乙醇儲存嗎？
親和填料通常保存在20%乙醇或2%苯甲醇中，并保證密封性，以防有機溶劑揮發(fā)。乙醇含量低于18.5%的情況下，抑菌效果會減弱，應及時更換。
3.填料出廠的時候填料的微限和內(nèi)毒標準是多少？
賽分科技嚴格控制填料產(chǎn)品質(zhì)量，微生物限度標準與進口品牌一致，為20 cfu/mL；內(nèi)毒素控制標準與進口品牌一致，為5 EU/mL。
