Agarosix MC90 IMAC填料是金屬親和層析填料,適用于純化組氨酸(His)標簽的重組蛋白,這類重組蛋白廣泛應用于生物技術領域。該填料以瓊脂糖為基質,粒徑為90 μm, Agarosix MC90-Ni Excel為TED類型的Ni親和層析填料,不用重復上Ni; Agarosix MC90-NTA Ni為NTA類型親和填料,具有更高載量。瓊脂糖基質的親和層析填料具有良好的生物相容性,避免了與生物類樣品的非特異性吸附。瓊脂糖表面專有連接物鏈接了能螯合多價金屬離子的羧酸基團。
介質特性:
填料類型 | Agarosix MC90-NTA Ni | Agarosix MC90-Ni Excel |
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基質 | 高交聯6%瓊脂糖 | 高交聯6%瓊脂糖 |
粒徑 | 90 μm | 90 μm |
pH 穩定性(操作) pH穩定性(CIP) |
3~12 2~14 |
2~12 2~14 |
螯合比例 | 4 : 2 | 5 : 1 |
His-tag Protein載量 | ≥ 50 mg/mL | ≥ 35 mg/mL |
操作溫度 | 2~40℃ | 2~40℃ |
操作壓力 | 1100 cm/hr,柱高:200 mm, 壓力 1.5 bar(0.5 M NaCl) | |
流動相兼容性 | 水溶液,或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物、常用緩沖液 | 耐受100mM EDTA(2h)、10mM EDTA(24h)、10mM DTT |
Ni補充頻率 | Ni易脫落,一般3-5次需重新補Ni | 不用重復上Ni |
清洗(CIP) | 0.1 M NaOH | 0.5 M NaOH |
再生條件 | 含0.1-1 M咪唑的緩沖溶液 | |
儲存 | 4-35°C,50% (v/v) ,保存于20%乙醇中 |
常規線速度下(200-400cm/h),在幾種常見流動相中填料壓力表現良好,低于1 bar;建議裝柱高度20-25 cm。
Column:Agarosix MC90-Ni Excel、競品Ni Excel
Mobile Phase: A: 50mM PB,500mM NaCl,pH8.0; B: 25M PB,500mM 咪性,pH8.0
測試樣品:His-tag Protein
在100 mM EDTA條件下泡堿1 h, Agarosix MC90-Ni Excel DBC下降至67.98%,競品Ni Excel下降至42.06%;
在EDTA耐受性方面,Agarosix MC90-Ni Excel具有更高的耐受性。
耐堿測試實驗條件
泡堿濃度:1 M NaOH溶液
Column:Agarosix MC90-Ni Excel、競品Ni Excel
泡堿測試模擬填料壽命實驗,一般CIP條件0.5 M堿洗5-6CV,約30min。泡堿48h相當于96次純化實驗CIP,Agarosix MC90-Ni Excel與競品保持在初始載量的80%左右,整體耐堿性能與競品相當。
產品名稱 | 粒徑 | 訂貨號 |
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Agarosix MC90-Ni Excel | 90 | 251590990 |
Agarosix MC90-CA Excel | 90 | 252390990 |
Agarosix MC90-NTA Ni | 90 | 251390990 |
Agarosix MC90-NTA CA | 90 | 252290990 |
預裝柱規格為4.2 、5 mL,包裝規格為1L、5 L 、10 L、50 L。