Monomix MC-NTA IMAC填料是一種金屬親和層析填料，適用于純化組氨酸（His）標簽的重組蛋白，這類重組蛋白廣泛應用于生物技術領域。該填料以親水性聚甲基丙烯酸酯微球為基質，粒徑為60 μm，孔徑為1000 Å，具有較高的物理和化學穩定性。填料表面具有高度親水性，最大程度地避免了與生物類樣品的非特異性吸附。在親水性表面，以專有連接物鏈接了能螯合多價金屬離子的羧酸基團。
Monomix MC-NTA IMAC填料有兩種類型：游離酸型 (Monomix MC-NTA CA)和螯合鎳離子型 (Monomix MC-NTA Ni)。游離酸型可用于金屬離子去除，也可根據客戶要求定制其他金屬離子型填料。這兩種類型的IMAC填料結構如下圖所示。Monomix MC-NTA IMAC填料可重復使用。
Monomix MC60-NTA Ni
Monomix MC60-NTA CA
建議使用純水或NaCl溶液裝柱；常用線性流速下，Monomix MC60-NTA Ni填料背壓低
該填料化學穩定高，可耐受0.1-0.5 M NaOH溶液清洗循環。該填料不耐EDTA及DTT。使用一段時間后需重新補充金屬離子。
| 填料類型 |
Monomix MC60-NTA Ni
|
Monomix MC60-NTA CA
|
|---|---|---|
| 基質 |
親水性聚甲基丙烯酸酯
|
|
| 粒徑 |
60 µm
|
|
| 孔徑 |
1000 Å
|
|
| 組氨酸標記蛋白(His-protein) 載量/離子交換當量 |
≥35 mg/mL 填料
|
>100 μeq./mL（羧酸含量）
|
| 最大線性流速 |
≤1800 cm/h
|
|
| 操作溫度 |
≤40°C
|
|
| pH適用范圍 |
1-13
|
|
| 操作壓力 |
≤1 MPa(10 bar)
|
|
| 流動相兼容性 |
水溶液，或水和乙腈、丙酮或甲醇的混合物。常用緩沖液：磷酸鹽、三羥甲基氨基甲烷(Tris)和醋酸鹽，也與6 M鹽酸胍、8 M尿素相容
|
|
| 期保存方法 |
50% (v/v) ，保存于20%乙醇中
|
|
| 再生 | EDTA脫去Ni 離子后，用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干凈，重新補充Ni 離子 | EDTA脫去金屬離子，用0.1-0.5 M的NaOH 溶液清洗干 |
| 清洗 |
0.1 M NaOH清洗
|
|
上樣：樣品泵進樣30mg/mL，柱留時間5min，UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。5min駐留時間。
淋洗：使用50mM PB，1M NaCl，pH8.0沖洗層析柱5CV，UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。5min駐留時間。
再平衡：使用平衡液50mM PB，200mM NaCl，pH8.0再平衡層析柱3CV，5min駐留時間。
洗脫：使用洗脫液（ 50mM PB，200mM NaCl，500mM 咪唑，pH8.0）洗脫，8CV，5min駐留時間。UV280nm信號值20mAU-20mAU收集。
Column: Zenix SEC-300 (3μm, 300 Å, 4.6×300 mm)
Mobile phase: 150mM PB，pH 7.0
Flow rate: 1mL/min
Detector: UV 280 nm
Column temperature: 25 ℃
| 產品名稱 | 粒徑（µm） | 訂貨號 |
|---|---|---|
| Monomix MC60-NTA CA | 60 | 285560950 |
| Monomix MC60-NTA Ni | 60 | 285460950 |
